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測定膳食纖維的標準方法

更新時間:2022-07-18 點擊次數:1738


一、實驗原理

膳食纖維又稱為植物細胞壁,它包括纖維素、半纖維素、木質素、果膠、角質和二氧化硅等。本實驗用中性洗滌纖維測定法測定,該法所測的膳食纖維為不被人消化系統中的酶所消化,也不被中性洗滌劑溶解的組分。其原理是樣品經熱的中性洗滌劑浸煮后,殘渣用熱的蒸餾水充分洗滌,除去樣品中游離淀粉、蛋白質、礦物質,然后加入α淀粉酶溶液以水解結合態的淀粉,再用蒸餾水,丙酮依次洗滌,以除去殘存的脂肪、色素等,殘渣經烘干,即為不溶性膳食纖維。


二、實驗用品

(一)器材

(1)電熱恒溫干燥箱。

(2)恒溫箱。

(3)可調溫的電爐或可控溫的電熱板。

(4)抽濾裝置(包括抽濾瓶及水泵或真空泵)。

(5)干燥器(用無水氯化鈣或變色硅膠為干燥劑)。

(6)高型燒杯(容量600ml)。

(7)坩堝式耐熱玻璃濾器(容量為60ml,孔徑40~60µm;相當于250目~400目)。

(8)耐熱玻璃棉。


(二)試劑

(1)石油醚(沸點范圍35~60)。

(2)中性洗滌劑溶液

18.61g乙二胺四乙酸二鈉和6.81g四硼酸鈉(Na2B4O7.10H2O)用250ml蒸餾水加熱溶解;

?30g十二烷基硫酸鈉和10ml乙二醇獨Diethyl Ether(2-ethoxy-ethanol)溶于200ml熱蒸餾水中;

?4.56g Na2HPO4溶于150ml蒸餾水,將???3種溶液合并。然后用磷酸調節混合液pH至 6.9~7.1,zui后加蒸餾水至1000ml,即為中性洗滌溶液。此溶液使用期間如有沉淀生成,需在使用前加熱到60,使沉淀溶解。

(3)十氫萘。

(4)α淀粉酶溶液:取0.1mol/LNa2HPO4溶液610ml和0.1mol/L Na2HPO4溶液390ml混勻,配成pH7.0的磷酸鹽緩沖液。用此緩沖溶液配2.5%酶溶液,離心或過濾,取清液備用。

(5)丙酮。

(6)無水亞硫酸鈉。


(三)材料

小麥麩皮。

三、實驗程序

 1、樣品處理

    將烘干樣品磨細過20~30篩。準確稱取0.500~1.000g置于高型燒杯中。

 2. 加試劑

   依次加入以下試劑于高型燒杯中:

n中性洗滌劑溶液100ml(室溫)

n十氫萘2ml(樣品煮沸時如產生的泡沫不多,則可不加此試劑)。

n無水亞硫酸鈉0.5g。

3.熱處理

將上述燒杯置于電爐上加熱,使杯內溶液在5~10min內煮沸,自沸騰計時,維持微沸60min。

4.洗滌

    將燒杯內的內容物移入已稱重之耐熱玻璃濾器(內鋪有耐熱玻璃棉,并已于110烤箱烘至恒重內,抽濾至干,再加入熱蒸餾水(100)約100ml洗殘渣,重復洗3次(用熱蒸餾水量約為 300~500ml)。

5. 酶處理

     加酶溶液約50ml于濾器中(濾器底部須加塞子,使之不漏溶液),使酶液浸沒殘渣,并加數滴甲苯以防腐,然后于恒溫箱37放置18h或過一整夜。

6.洗滌

    取出濾器,除去底部的塞子,抽濾,并用熱水約500ml分次洗去酶液。用碘液檢查是否有淀粉殘留,如淀粉已除盡,則可抽干濾液,然后加丙酮洗殘渣,抽干,再以丙酮洗一次。若有淀粉殘留,需重復“酶處理"步驟。

7. 將殘渣及濾器于烘箱中110烘至恒重,每次稱重時應先移入干燥器中,冷至室溫后稱量。

8.結果處理

    按下式計算樣品中膳食纖維含量:

膳食纖維(含灰分)=

(濾器+殘渣)的重量-濾器重量

×100%

樣品重量





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